大巴车司机几点在高速上必须休息

大巴车凌晨2点至5点在高速上必须休息。高速公路上，大巴车行驶时间过长会导致驾驶员疲劳，增加交通事故的风险。为了保障乘客和驾驶员的安全，相关规定强制要求大巴车在高速公路上必须进行休息。

具体规定如下：

1、长途客运车辆凌晨2时至5时停止运行或实行接驳运输，凌晨2点后禁止长途客车从收费站口上高速，对此时间段内正在高速公路上行驶的长途客车就近引导到服务区或客运站停车休息。从事线路固定的机场、高铁快线以及短途驳载且单程运营里程在100公里以内的客运车辆，在确保安全的前提下，不受凌晨2时至5时通行限制。                   

2、驾驶员连续驾驶4小时后，必须停车休息至少30分钟。

3、大巴车行驶8小时后，必须停车休息至少1小时。这个规定是为了防止驾驶员长时间连续驾驶导致疲劳驾驶，减少交通事故的发生。